欧美日韩精品久久久久免费看|亚洲欧美日韩精品久久首页|日本 成人 国产一区二区|一区二区三区在线/欧美

您的位置: 首頁 > 技術(shù)文章 > 原子力顯微鏡的應(yīng)用及樣品要求

原子力顯微鏡的應(yīng)用及樣品要求

更新時(shí)間:2023-05-31瀏覽:911次

原子力顯微鏡的應(yīng)用

AFM以其操作方便,對(duì)樣品處理要求不高,原子級(jí)分率低,樣本可在空氣中成者液體中直接觀察,可檢測(cè)的樣品范圍廣等優(yōu)點(diǎn),贏得了越越廣闊的應(yīng)用,利用AFM可以觀察生物制品的形態(tài)結(jié)構(gòu)、檢測(cè)生物力、觀察品體的三結(jié)構(gòu)及插體的生長等,這勢(shì)必會(huì)進(jìn)一步推動(dòng)生命科學(xué),材料科學(xué)的一步發(fā)展。
 
(一)生命科學(xué)中的應(yīng)用
1.用于形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察
 
由于AFM具有光學(xué)顯微鏡所不具備的高分辨率,同時(shí)又不需掃描電子顯微鏡的嚴(yán)格制樣要求。AFM已廣泛地應(yīng)用于細(xì)胞、蛋白質(zhì)、核酸等生物形態(tài)結(jié)構(gòu)的研究。
目前,生物學(xué)家們已經(jīng)利用AFM研究活細(xì)胞或固定的細(xì)胞,如紅細(xì)胞、白細(xì)胞等,獲得了豐富的信息。對(duì)于單個(gè)細(xì)胞而言,AFM不但能夠提供長度、寬度、高度等形態(tài)方面的信息,而且可以滿足人們對(duì)膜上的離子通道、絲狀偽足、細(xì)胞間連接等細(xì)微結(jié)構(gòu)研究的要求,甚至還可清楚地觀察到膜本身的骨架結(jié)枃。這些對(duì)于進(jìn)步研究細(xì)胞表面及表面以下結(jié)構(gòu)相互作用很有啟發(fā)性。
 
AFM還可以觀察蛋白質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu),測(cè)算復(fù)合物中蛋白質(zhì)的大小,最早用AFM研究的膜蛋白是 halo bacterium halobim的紫膜上的視紫紅蛋白,得到視紫紅蛋白在膜上呈二維的六角形排列。AFM還比較成功地觀察了肌動(dòng)蛋白、血纖維蛋白原,膠元蛋白,免應(yīng)球蛋白等游離蛋白質(zhì)分子,隨著深針技術(shù)的不斷改進(jìn),觀測(cè)到了肌動(dòng)蛋白分子的螺旋構(gòu)造,通過AFM對(duì)肌動(dòng)蛋白聚合、解聚、破裂、彈性系數(shù)變化等過程的觀察,進(jìn)步證實(shí)肌動(dòng)蛋白的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)對(duì)于活細(xì)胞的穩(wěn)定性起決定作用。
 
2.用于動(dòng)態(tài)過程的研究
 
AFM可以在生理狀態(tài)下觀察任何活的生命樣品和動(dòng)態(tài)過程,主要有生物大分子之間的生化反應(yīng)過程、病毒對(duì)細(xì)胞的感染過程、蛋白質(zhì)的結(jié)晶析出等等,已被廣泛地應(yīng)用到生物樣品中。
 
觀察生物大分子之間的生化反應(yīng)過程,對(duì)于研究生物的結(jié)構(gòu)與功能有很大的幫助,有很多實(shí)驗(yàn)動(dòng)態(tài)觀察了DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的翻譯過程,有些實(shí)驗(yàn)則觀察DNA、RNA與酶結(jié)合過程,使人們對(duì)這些生化反應(yīng)有了更進(jìn)一步的了解,此外,AFM可以清晰地看到RNA聚合酶在DMA模板中運(yùn)動(dòng),這種技術(shù)用于更大的分子,將會(huì)提高特異治療藥物插人的幾率,那樣很多疑難疾病的治療就成為可能。
 
病毒對(duì)細(xì)胞的感染是一個(gè)很典型的例子,應(yīng)用AFM已觀察了痘節(jié)病毒感染單個(gè)細(xì)胞的過程。將痘苗病毒加人培養(yǎng)液后,細(xì)胞變得光采軟,在這種狀態(tài)下病毒易于穿過細(xì)跑膜。
 
蛋白質(zhì)從溶液中結(jié)品析出也是一個(gè)分值得關(guān)注的領(lǐng)域,人們采用AFM研究溶菌蛋白、刀豆蛋白、TEuvEaLit和過氧化氫測(cè)得的情況,這些研究有助于人們更加深入地理解蛋白質(zhì)晶體的生長動(dòng)力學(xué)和成核機(jī)理。
 
原子力顯微鏡樣品的要求
原子力顯微鏡研究對(duì)象可以是有機(jī)固體、聚合物以及生物大分子等,樣品的載體選擇范圍很大,包括云母片、玻璃片、石墨、拋光硅片、二氧化硅和某些生物膜等,其中常用的是新剝離的云母片,主要原因是其非常平整且容易處理。而拋光硅片最好要用濃硫酸與30%雙氧水的7∶3 混合液在90 ℃下煮1h。利用電性能測(cè)試時(shí)需要導(dǎo)電性能良好的載體,如石墨或鍍有金屬的基片。
 
試樣的厚度,包括試樣臺(tái)的厚度,最大為10 mm。如果試樣過重,有時(shí)會(huì)影響Scanner的動(dòng)作,請(qǐng)不要放過重的試樣。試樣的大小以不大于試樣臺(tái)的大小(直徑20 mm)為大致的標(biāo)準(zhǔn)。稍微大一點(diǎn)也沒問題。但是,最大值約為40 mm。如果未固定好就進(jìn)行測(cè)量可能產(chǎn)生移位。請(qǐng)固定好后再測(cè)定。

 

Contact Us
  • QQ:3218790381
  • 郵箱:[email protected]
  • 地址:上海市閔行區(qū)中春路7001號(hào)C座1003室

掃一掃  微信咨詢

©2024 上海爾迪儀器科技有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):滬ICP備19038429號(hào)-5    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    Sitemap.xml    總訪問量:123867    管理登陸